期刊简介
《临床普外科电子杂志》现为季刊，目前已被中国学术期刊网络出版总库及万方数据库全文收录。本刊紧密结合国内外医学学科的前沿进展，重点报道普通外科领域先进的科研研究成果、临床诊断技术、临床治疗技术、临床新的手术技术措施及其手术改进、治疗经验和教训，以及与普通外科密切相关的医学基础理论研究和临床研究等。
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- 杂志名称：临床普外科电子杂志
- 主管单位：中华人民共和国卫生部
- 主办单位：人民卫生出版社
- 国际刊号：2095-5308
- 国内刊号：11-9331/R
- 出版周期：季刊
期刊荣誉：中国期刊全文数据库（CJFD）期刊收录：万方收录(中), 知网收录(中)
人LIGHT基因重组慢病毒的构建以及在脐血间质干细胞中的表达
马贵亮；宣世英；朱新红；毛伟征
关键词：慢病毒载体, 人LIGHT基因, 人脐血间质干细胞
摘要：目的 构建带有人LIGHT基因的慢病毒载体,观察其在人脐血间质干细胞中的表达.方法 通过逆转录聚合酶链反应从PCD DNA-LIGHT质粒中获得人LIGHT基因,利用infusion技术重组构建慢病毒载体质粒pGC-FU-LIGHT,在脂质体lipofectamine 2000介导下与结构质粒pHelper1.0及包膜蛋白质粒pHelper2.0共转染293T细胞包装生产慢病毒.将人脐血间质干细胞分为实验组(pGC-FU-LIGHT)、空载体对照组(pGC-FU-EGFP)及空白组(脐血间质干细胞),分别用重组慢病毒、空载慢病毒、PBS感染后,采用RT-PCR以及Elisa检测LIGHT表达情况.结果 所获LIGHT基因经测序后与Gene Bank报道序列完全一致;重组慢病毒载体质粒pGC-FU-LIGHT经鉴定正确;三质粒共转染293T细胞成功,收集、浓缩病毒后测定其滴度为2×107TU/L,感染UCBMSCs后RT-PCR、Elisa检测各组细胞均有LIGHT的表达,其中试验组pGC-FU-LIGHT组更大量表达LIGHT,与其余2组(pGC-FU-EGFP、UCBMSCs)比较差异具有统计学意义.结论 成功构建带有LIGHT基因的慢病毒载体并实现在脐血间质干细胞中的表达,为间充质干细胞移植治疗胃癌的应用奠定了基础.
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